近日,《植物通讯》上在线发表了题为《利用CRISPR编辑BnaIDA基因创建抗裂角、花器官不脱落和避菌核病甘蓝型油菜新种质》的论文。该研究利用CRISPR/Cas9系统成功同时编辑了植物小肽基因BnaIDA-A07/C06,获得了不含外源T-DNA的稳定遗传双突变株系;并显示该株系具有避菌核病、花器官不脱落和抗裂角的优良性状。
在拟南芥中,花器官的脱落受到IDA小肽、HAE/HSL2受体、MAP级联信号及其下游KNOX转录因子的调控;IDA信号通路主要调控花器官脱落的后期,通过促进细胞壁的酶解,直接诱导花器官的脱落。
该研究成功从油菜中克隆出IDA的同源基因:通过生物信息学方法比对后,发现BnaIDA-A07/C06基因与拟南芥IDA的亲缘关系最近,且在花和角果中高表达。接着利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对这两个基因同时编辑,并通过自交,成功分离出外源Cas9蛋白,获得的纯合ida-d17突变体从开花期至角果完全成熟的过程中,花器官始终不脱落,可延长油菜花的观光时间。
角果开裂也是一种细胞分离过程。由于角果成熟的不一致性,油菜籽粒的损失明显。对ida-d17的成熟角果进行开裂力测试发现,ida-d17的角果抗裂能力增强。自然条件下,核盘菌子囊孢子在油菜凋落的花瓣中带菌率最高,那么,阻断花器官的脱落是否可防止菌核病的传播呢?与野生型相比,课题组发现在人工条件下,尽管核盘菌子囊孢子仍在ida-d17突变体的花瓣中萌发,并表现出弱的病症,但由于花瓣不脱落,核盘菌无法在湿度较大的油菜叶片和叶腋处大面积生长并致病,表明ida-d17突变体花器官的不脱落具有菌核病避病性状。
综上所述,该研究通过CRISPR编辑技术创制了一种新的种质资源,它既能减少机械化收获过程中的损失,避菌核病,又有利于油菜观光产业。
据悉,江苏大学研究员谭小力为通讯作者,江苏大学博士生耿瑞为论文第一作者。江苏大学智能农机装备理论与技术重点实验室教授徐立章、挪威科学与文学学院院士ReidunnAalen和挪威奥斯陆大学博士施春林参与了部分研究工作。该研究工作由江苏省农业科技自主创新资金项目的资助完成。
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